互补 DNA (cDNA) 是由信使 RNA 分子合成的 DNA。 cDNA 合成由一种称为逆转录酶的酶催化，该酶使用 RNA 作为 DNA 合成的模板。 逆转录酶最初是从逆转录病毒中发现和分离的。 这些病毒包含一个 RNA 基因组； 因此，病毒需要产生其基因组的 cDNA 拷贝，以与宿主细胞的分子机制相容。
图1.cDNA的合成
有多种合成 cDNA 的方法； 我们简单介绍下传统方法合成 cDNA。
oligo(T) 片段用作引物以结合每个 RNA 的 3' poly(A) 尾巴。
逆转录酶以 RNA 为模板合成 cDNA 链。
所得的 RNA-cDNA 杂交体用碱或 RNase 处理以水解 RNA。
搁浅的 DNA 自身折叠起来并在 3' 端形成一个环。 由此产生的环的双链部分作为 DNA 聚合酶的引物，合成互补的 DNA 链。
S1 核酸酶将切断环，产生双链 DNA。
